Il pregnenolone è biochimicamente un proormone. È prodotto direttamente dal colesterolo all'interno dei mitocondri delle ghiandole surrenali e, in misura minore, del sistema nervoso, con l'aiuto dell'enzima di scissione della catena laterale del colesterolo, p450scc. Il pregnenolone è un precursore di vari ormoni, come progesterone, mineralcorticoidi, glucocorticoidi, androgeni ed estrogeni. Quindi può aiutare il corpo a mantenere i normali livelli ormonali, che a sua volta aiuta numerose funzioni del corpo.